Hämorrhagische Septikämie der Kaninchen (Rabbit Haemorrhagic Disease, RHD) ‐ Untersuchungen zum quantitativen Antigennachweis

Abstract

SummaryRabbit Haemorrhagic Disease (RHD) ‐ investigation for quantification of antigenThe efficiency of a vaccine of inactivated virus is influenced to a great deal by the mass of antigen per dose of application. Therefore it is essential to know the concentration of the antigen. We tested a physical method for quantification of the RHD‐Virus. It implies a centrifugation of the prepurified, if necessary, preconcentrated infectious or inactivated virus in a gentle sucrose gradient. It is followed by analysis in a sensitive UV flow‐through photometer with a computer calculated virus mass. The extinction coefficient (optical density) of the virus (175S‐component) at 254 nm is 3.9cm2/mg. The haemagglutination test and the ELISA were used to prove the virus specificity of the optical peak and partial for comparing them with the method mentioned above.ZusammenfassungDie Wirksamkeit einer Vakzine aus inaktiviertem Virus wird in entscheidendem Maße von der Antigenmenge pro Impfdosis bestimmt. Daher ist es wichtig, die Konzentration des Antigens zu kennen. Es wurde eine physikalische Viruskonzentrationsbestimmungsmethode für das HSK‐Virus erprobt. Sie beinhaltet eine Zentrifugation im flachen Saccharosedichtegradienten von (vorgereinigtem) nötigenfalls vorkonzentriertem infektiösem oder inaktiviertem Virus mit anschließender Analyse im nachweisempfindlichen UV‐Durchflußphotometer bei computergestützter Auswertung.Der Extinktionskoeffizient des Virus (175 S‐Komponente) bei 254 nm liegt bei 3,9 cm2/mg.Zum Nachweis der Virusspezifitat der optischen Peaks und z.T. vergleichend wurden der Hämagglutinationstest und der ELISA eingesetzt.